尿液的处理方法、抗生素的检测方法及应用,涉及尿液的处理及检测技术领域,以改善现有处理方法的过程复杂,且成本较高的技术问题。本发明尿液的处理方法包括如下步骤：将尿液取样后离心取上清液,然后向上清液中加入酸化乙腈后超声处理,再加入无水硫酸钠,然后离心取上清液,氮吹干后用溶剂定容,得到待检测的样品。该方法步骤简单,操作方便,处理效率高,稳定效果好,处理成本低,利用实验室常见的耗材就能完成,检测成本投入低。同时本发明还提供抗生素的检测方法,将尿液采用上述方法处理后以液质联用仪进行检测,限定了特定的检测条件,该检测方法快速、高效、低成本、高度自动化且便于产业化应用。