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以国家标准GB 5009.88-2014中酶-重量法为依据,利用DF-602膳食纤维测定仪测定食品中膳食纤维

[导读] 以国家标准GB 5009.88-2014中酶-重量法为依据, 样品在膳食纤维仪上经酶解处理、乙醇沉淀、洗涤抽滤得残渣, 残渣干燥称重, 再扣除膳食纤维残渣中的蛋白质、灰分和试剂空白即为样品中的膳食纤维。结论 采用膳食纤维测定仪进行测定集在线酶解、恒温、加热、洗涤抽滤于一体, 操作简便, 结果准确,

膳食纤维的定义和测定方法一直是彼此相互关联的。各种膳食纤维的测定方法因其测定原理不同结果差异较大, 具有代表性的方法涉及洗涤法 (非酶-重量法) 、酶-化学法和酶-重量法。洗涤法原理为选择适当洗涤剂除去淀粉、蛋白质等被溶解物质后, 不能消化的纤维紊、半纤维素、木质素等残渣即为膳食纤维, 尽管操作相对简单, 但不能完全去除淀粉, 过滤困难, 且只适用于不溶性膳食纤维的测定。酶-化学法是指在样品进行酶解、酸水解处理后, 可根据实际条件采用比色、气-液色谱法 (gas-liquid chromatography, GLC) 或高效液相色谱法 (high performance liquidchromatography, HPLC) 任一方法测定其水解成分, 如酶重量法-HPLC法可检测含低分子质量抗性麦芽糊精的总膳食纤维, 抽滤物要进一步用其他大型分析仪器完成, 操作要求高, 耗时多, 不适于常规分析。酶-重量法是目前公认的测定总膳食纤维含量 (total dietary fiber, TDF) 、可溶性膳食纤维 (soluble dietary fiber, SDF) 和不可溶性膳食纤维 (insoluble dietary fiber, IDF) 含量的方法, 其原理是用α-淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解以除去蛋白质和淀粉, 然后经乙醇沉淀、过滤得残渣, 乙醇和丙酮洗涤残渣后干燥称重, 得到总膳食纤维残渣, 扣除蛋白质、灰分和试剂空白即得校正膳食纤维的量。各种方法中均涉及过滤步骤, 也是检测方法的关键瓶颈, 消化洗涤液很难过滤, 不仅耗时, 样液也易流失, 影响了结果的准确性, 采用膳食纤维测定仪可解决这一难题, 而在GB5009.88-2014等标准方法中均未提及纤维测定仪。本文依据国家标准方法中的原理及步骤, 采用纤维测定仪测定食品中膳食纤维, 使消解或酶解、洗涤抽滤在线连续操作.所需仪器与试剂;DF-602膳食纤维测定仪 (上海纤检仪器有限公司) ;SX-4-10箱式电阻炉 (上海甘易) ;9070A电热恒温鼓风干燥箱 (上海甘易) ;AB104-S/A分析天平 (梅特勒-托利多仪器 (上海) 有限公司) 等。α-淀粉酶、蛋白酶、淀粉葡萄苷酶 ;酸洗硅藻土、乙醇、丙酮 (分析纯, 国药集团化学试剂有限公司) 。元麦 (无锡中粮工程科技有限公司) ;燕麦  ;奶粉  ;大豆多糖;天津麻花 (天津食品研究所提供) ;熟浆工艺豆渣  ;膳食纤维营养粉  ;膳食纤维低聚木糖;微晶纤维素 (德国MACHEREY-NAGEL公司) 。0.05 mol/L MES-TRIS缓冲液:称取9.76 g 2- (N-吗啉代) 乙烷磺酸 (MES) 和6.10 g三羟甲基氨基甲烷 (TRIS) , 用850 m L蒸馏水溶解, 用6 mol/L氢氧化钠在温度为24℃时调p H至8.2, 加水稀释至1 L。3 mol/L乙酸溶液:取172 m L乙酸, 加入700 m L水, 混匀后用水定容至1 L。热稳定性α-淀粉酶液:10000±1000 U/m L。蛋白酶液:300~400 U/m L。淀粉葡萄糖苷酶液:2000~3300 U/m L。

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