一、试验材料与试验方法

1.试验材料
饮用水、生理盐水缓冲液、营养琼脂、锥形瓶、无菌培养皿、净水机。
2.试验方法
菌落总数采用平板计数法:样品稀释,培养，菌落计数。

二、菌落总数的检测

1.样品稀释
(1)以无菌吸管吸取25m L样品置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
(2)用fmL无善吸管吸取1:10样品匀液波1n L，沿管壁缓慢注于盛有9m L稀释波的无菌试管中(注意吸管不要触及稀释液面)），振遥试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:10的样品匀液。
(3）按步骤(2)的操作，制备10倍系列稀释样品溶液。每递增稀释一次，换用1次1m L无菌吸管。
(4)根摇对样品运染状况的估计，选择(2-~3)个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，吸取1⑴mL样品匀液于无菌平Ⅲ内，每个稀释度做两个平皿:同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作为空白对照使用。
(5)及时将(15~20)mL冷却至46℃的平板计数培养基（可放置于(46+1)“C恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
2.培养
待琼脂凝固后，将平板翻转，(36±1)℃培养（(48±2)h。
3.菌落计数
(1)可用肉眼现察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数星。菌落计数以菌落形成单位(oiony-frming unis CFU)表示，选取菌落数在3O0CFIU~30CFU之间、无真延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
(2)其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状薛落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。
(3）当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。