显微镜操作较复杂,对于新用户而言对设备的选用存在一定困惑。通过阐述双光子显微镜的工作原理、样品前期准备、成像难点及设备使用和日常维护要点,梳理双光子显微镜与其他同类成像类设备在成像原理、配置参数、成像特点及应用领域等方面的区别,总结双光子显微镜的应用特点及优势,为从事医学临床、教学及科研提供参考。双光子显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜及双光子激发技术的一种新精密仪器。宁波永新光学股份有限公司了解到在激光扫描显微镜的基础上,双光子显微成像技术以红外飞秒激光作为光源,受散射影响较小,易穿透样本,可深入组织内部非线性地激发荧光,减小激光对生物体的损伤,光毒性小且具有高空间分辨率,适合生物样品的深层成像及活体样品的长时间观察成像。双光子显微镜已成为生命科学各领域重要的研究工具,可在细胞甚至是亚细胞水平对活体动物的神经细胞形态结构、离子浓度、细胞运动、分子相互作用等生理现象进行直接的长时间成像监测,还能进行光激活染及光损伤等光学操纵,宁波永新光学生产的显微镜广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究。通过阐述双光子显微镜的工作原理、样品前期准备、成像难点及设备使用及日常维护要点,梳理双光子激光共聚焦与其他同类成像类设备在成像原理、配置参数、成像特点及应用领域等方面的不同,为使用者提供更多实验方法参考,使之更好地服务于医学临床、教学和科研。