引 言

高压蒸汽灭菌是一种常用的灭菌方法，广泛用于生 物 制 药、医 疗 卫 生、食 品 生 产 等 领 域［１］。运 用高压蒸汽灭菌技术，在高密封性的装置内，蒸汽压力随温度增高而升高，从而达到灭菌作用。高压蒸汽灭菌器的实际工作温度和压力是影响灭菌效果的重要因素，作为临床应用的高风险设备，对其进行定期质量检测与校准非常重要［２］。目前对灭菌设备灭菌效果的检验一般有化学方法、生 物 方 法 及 物 理 方 法［３］。由 于 生 物、化 学 方 法只能显示最终结果，对灭菌温度是否达到，灭菌时间是否符合要求等灭菌工艺过程要求无法进行判断。

物理验证采用温度、压力传感器将其置于灭菌器腔体内，在灭菌过程中进行温度、压力等物理参数的校准，以确定是否达到预期目标，并与灭菌器的温度、压力显示仪表比较，得出综合结果。在英国、欧盟等国家和地区，英国标准 ＨＴＭ２０１０［４］、欧标 ＥＮ５５４［５］等国外标准对高压蒸汽灭菌器运行时性能测试提出了明确的要求，并指出对灭菌设备的物理验证不可替代［６］。波义耳定律、Ｃｌａｕｓｉｕｓ－Ｃｌａｐｅｙｒｏｎ方程和道尔顿分压定律可知，压力蒸汽灭菌器中混合气体的压力和温度之间存在一定关系。通过校准高压蒸汽灭菌器的温度可间接确定其腔体内的压力，因而对灭菌器温度的校准尤为重要。

目前国内高压蒸汽灭菌器物理校准主要参考ＧＢ／Ｔ３０６９０———２０１４《小型压力蒸汽 灭 菌 器 灭 菌 效果监测方法和评价》、ＹＹ１００７———２０１０《立式压力蒸汽灭菌器》等国家或行业标准。本文参考上述规程，采用两种常见物理校准方法，分析比较小型卧式、手提式、立式三类不同容积的高压蒸汽灭菌器在相同灭菌温度工况下温度、压力校准数据，并对升温曲线进行分析，与 Ｃｌａｕｓｉｕｓ－Ｃｌａｐｅｙｒｏｎ方程及 Ａｎｔｏｉｎｅ方程进行比较，得出校准建议。

１ 小型高压蒸汽灭菌器校准方法

将温度传感器置于被校高压灭菌器的中心点位置，并让高压灭菌器进行一次完整的灭菌过程，升温过程中，注意将灭菌器腔体内空气完全排出。达到灭菌温度后，每２ｍｉｎ测试一组数据，测试３０ｍｉｎ，得到１５组数据，温度波动度为测得的１５组数据中的实际温度最大值减去实际温度最小值，除以２，并冠以“±”表 示。ＧＢ／Ｔ３０６９０———２０１４提 出 灭 菌 循 环中，灭菌温度范围的实测值一般不高于设定值３℃，压力范围应与实测温度范围相对应。同时考虑测量不确定度应小于被测设备最大允许示值误差的五分之一到三分之一之间，即０．６～１．０℃。本文着重讨论不同容积的高压灭菌器在两种常见校准方法下的中心点温度、压 力 校 准 结 果，校 准 环 境 温 度 为２０．０～２１．０℃，环境相对湿度为４５％～５０％。常见的校准方法有以下两种：

１．１ 采用无线温度压力数据采集器对高压蒸汽灭菌器的校准

无线温度压力数据采集器是将传感器采集到的温度及压力数据记录在采集器内。测试前，无线温度压力数据采集器设置相应的程序，将该采集器置于被校灭菌器腔体中心点位置进行校准。测试结束后，通过计算机配套的信号转换器以及软件读取记录的数据。目前，该类数据采集器的温度测试准确度为±０．１℃、压力测试准确度为±０．１ｋＰａ，一次可记录近２万个数据，工作动力为设备内的锂电池，使用寿命为５年左右。这种校准方式是由于没有引入外部连接线，灭菌器腔体密封完好，确保数据真实可靠，该设备可直接测得灭菌器腔体内的实际压力值。但该套装置的初期成本达数十万元，且使用寿命也仅在五年左右，需要通过电脑读取分析采集数据，如需实时监测数据，则需投入更高的资金。因而，该类装置在基层计量校准机构、灭菌器用户等群体中并没有得以广泛推广。

１．２ 采用热电偶对高压蒸汽灭菌器的校准

热电偶是常见的测温传感器，测试前，将较细的Ｔ 型热电 偶（一 般 线 径≤１．０ｍｍ）一 端 置 于 高 压 蒸汽灭菌器腔体中心点，盖好高压蒸汽灭菌器，并尽量使其密封，高压蒸汽灭菌器开始工作后，有少量蒸汽通过热电偶引出口溢出，但高压蒸汽灭菌器仍可继续升温工作，升温过程中，将灭菌器腔体内的空气完全排出，当高压蒸汽灭菌器处于灭菌状态时，通过数据采集器对温度数据进行采集。根据 Ａｎｔｏｉｎｅ方程将测得的温度数据换算为理论压力值，并与无线温度压力数据采集器测得的数据进行对比。该方法使用目前广泛使用的热电偶，使高压蒸汽灭菌器的校准变得方便简单，但由于热电偶的引入，使得整个灭菌过程中始终有漏气点的存在，在一定程度上会对测试结果有所影响。

２ 结果与讨论

２．１ 灭菌器容积对温度校准结果的影响

由理想气体状态方程、Ｃｌａｕｓｉｕｓ－Ｃｌａｐｅｙｒｏｎ方程和道尔顿分压定律可知，高压蒸汽灭菌器中混合气体的压力和温度之间存在一定关系。采用热电偶校准高压灭菌器时，存在一个小的漏气孔，从而使得腔体内的压 力 发 生 变 化，间 接 导 致 了 温 度 的 改 变。表１为不同容积高压蒸汽灭菌器在相同校准温度下的校准结果比对。

３ 结束语

采用热电偶对高压蒸汽灭菌器进行校准时，存在小漏气孔，温度校准存在一定偏差。对于小容积（≤３０Ｌ）的高 压 蒸 汽 灭 菌 器，可以采用热电偶的方式，直接进行温度校准，并通过 Ａｎｔｏｉｎｅ公式计算腔体内的压力，其校准温度误差在０．５℃之内，压力误差在５ｋＰａ左 右。而对于容积较大的灭菌器，通 过热电偶引入的方式进行温度和压力校准会引起较大的误差，应当采用无线温度压力数据采集器直接进行温度和压力校准。

无论采用无线温度压力数据采集器，还是采用热电偶对高压蒸汽灭菌器进行校准时，其升温过程均符合 Ｃｌａｕｓｉｕｓ－Ｃｌａｐｅｙｒｏｎ方 程。采 用 无 线 温 度压力数 据 采 集 器 进 行 校 准 时，温 度 压 力 关 系 接 近Ａｎｔｏｉｎｅ方程。升 温 过 程 中，高压蒸汽灭菌器容积越小，热电偶的引入会导致ｐ－Ｔ 曲 线 变 化 更 为 明显。为基层计量校准机构、灭菌器用户等群体对小容积高压蒸汽灭菌器进行低成本校准提供了理论和实验依据。