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北京六一琼脂糖凝胶电泳实验技巧-DYCP-31DN琼脂糖凝胶电泳槽

[导读]核酸分子是两性解离分子,在高于其等电点的电泳缓冲液中,其械基不解离,而磷酚基团全部解离,核酸分子因而带负电荷神电泳时向正极迁移。球脂糖主要从海洋榼格球脂中提取而来并经糖基化修饰,为一种聚合链线住分子,使用晾脂糖凝胶作为电泳支持介质,发挥分子筛功能,使得大小和构象不同的核酸分子的迁移率出现较大差异

配制凝胶的浓度据实验需要而变, 一般在0.8%~2.0%之间, 如果一次配制凝胶100 ml, 没用完的凝胶可以再次融化, 但随着融化次数的增加, 水分丢失也越多, 凝胶浓度则会越来越高, 导致实验结果不稳定, 补水办法:一是在容器上标记煮胶前的刻度, 煮胶后补充相应的水分至原刻度;二是在煮胶前称重, 煮胶后补充水至原重量。粗略一点的方法是通过多次较恒定的煮胶条件得出一个经验补水值。以保证凝胶浓度基本维持在原浓度。核酸染色剂溴化乙锭 (ethidium bromide) 可加在融化的琼脂糖中, 终浓度为0.5 μg/ml;也可在电泳结束后染色

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